(1) 10μg/ml 秋水仙素;2. 實(shí)驗(yàn)方法
(2)0.075M 低滲液: 2.795 KCl + 500ml 蒸餾水
(3) 固定液 ——甲醇:冰醋酸=3:1(該試劑必需現(xiàn)配現(xiàn)用)
(1) 當(dāng)細(xì)胞系的融合達(dá)到約75-90%時(shí),于每5ml 的培養(yǎng)基細(xì)胞中加入25-50μl 秋水仙素,繼續(xù)培養(yǎng)30min 至2 h(培養(yǎng)時(shí)間決定于細(xì)胞的生長(zhǎng)速度及不同種細(xì)胞系間的差異);
(2) 按照常規(guī)的方法用胰蛋白酶進(jìn)行細(xì)胞的消化;
(3) 將低滲液于37℃水浴中預(yù)熱;
(4)低滲:加入10ml 0.075MKCl 溶液,用力吹打散開(kāi),吹打100 次,37℃水浴低滲15 分鐘。
(5)預(yù)固定:加1.5ml固定液并用吸管輕輕吹勻,進(jìn)行預(yù)固定10分鐘。
(6)離心:2000rpm 離心5 分鐘,棄上清液。
(7)固定I:沿管壁慢慢加入固定液6ml,用吸管吹打成細(xì)胞懸液后,37℃水浴20 分鐘。
(8)離心:1000rpm 離心10 分鐘,棄上清液。
(9)固定II:同固定I。
(10)離心同步驟9,離心去上清后,、加0.3-0.5ml 固定液,吸管吹打成細(xì)胞懸液。(11)滴片:用吸管取細(xì)胞懸液,高度30-40 cm,滴在預(yù)冷的載玻片上,室溫晾干,然后90℃烤箱烤片0.5 小時(shí)。
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品介紹
F-0006
細(xì)胞染色體制備培養(yǎng)基
針對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞,即用型培養(yǎng)基,含L-谷氨酰胺,FBS,及PHA等。用于細(xì)胞學(xué)分析(核型等)。
F-0007
人外周血培養(yǎng)基
針對(duì)人外周血或大鼠、小鼠的外周血、脾臟,即用型培養(yǎng)基,含L-谷氨酰胺,FBS,及PHA等。
用于外周血體外培養(yǎng),及血液病的細(xì)胞學(xué)分析(核型等)。
F-0008
動(dòng)物外周血培養(yǎng)基
F-0009
人骨髓培養(yǎng)基
針對(duì)人骨髓或大鼠、小鼠骨髓、脾臟,即用型培養(yǎng)基,含L-谷氨酰胺,FBS,及PHA等。
用于骨髓體外培養(yǎng),及血液病的細(xì)胞學(xué)分析(核型等)。
F-0010
動(dòng)物骨髓培養(yǎng)基
F-0011
人羊水培養(yǎng)基
即用型培養(yǎng)基,含L-谷氨酰胺,FBS,及PHA。
用于羊水細(xì)胞的體外培養(yǎng),及血液病的細(xì)胞學(xué)分析(核型等)。
另外,如果需要秋水仙素,PHA等其他染色體制備需要的試劑,請(qǐng)聯(lián)系我們。